rechèchbg

Chanpiyon ki lakòz eksplozyon diri a, Kosakonia oryziphila NP19, kapab itilize kòm yon pwomotè kwasans plant ak yon pestisid byolojik pou siprime eksplozyon diri varyete KDML105 la.

Etid sa a demontre ke chanpiyon senbyotik rizosfè a *Kosakonia oryziphila* NP19 ki izole nan rasin diri a se yon biopestisid pwomètè pou ankouraje kwasans plant ak biopestisid pou kontwole pirifizyon diri ki koze pa *Pyricularia oryzae*. Eksperyans in vitro yo te fèt sou fèy fre plant diri jasmen nan varyete Khao Dawk Mali 105 (KDML105). Rezilta yo te montre ke NP19 te efektivman anpeche jèminasyon konidi *Pyricularia oryzae* yo. Enfeksyon *Pyricularia oryzae* te anpeche anba twa kondisyon tretman diferan: premyèman, diri te kolonize ak NP19 epi inokile ak konidi *Pyricularia oryzae*; dezyèmman, yon melanj NP19 ak konidi *Pyricularia oryzae* te aplike sou fèy yo;
Bakteri rizosfè a *Kosakonia oryziphila* NP1914te izole nan rasin diri (*Oryza sativa* L. cv. RD6). *Kosakonia oryziphila* NP19 gen pwopriyete ki ankouraje kwasans plant, tankou fiksasyon azòt, pwodiksyon asid indolasetik (IAA), ak solubilizasyon fosfat. Sa ki enteresan, *Kosakonia oryziphila* NP19 pwodui kitinaz.14.Aplikasyon *Kosakonia oryziphila* NP19 sou grenn diri KDML105 amelyore siviv diri apre enfeksyon pyas diri. Objektif etid sa a se pou (i) klarifye mekanis inibitwa *Kosakonia oryziphila* NP19 kont pyas diri a epi (ii) envestige efè *Kosakonia oryziphila* NP19 nan kontwole pyas diri a.

t01d0027d95519bc7b3
Eleman nitritif yo jwe yon wòl enpòtan nan kwasans ak devlopman plant yo, yo sèvi kòm faktè ki kontwole divès maladi mikwòb. Nitrisyon mineral yon plant detèmine rezistans li kont maladi, karakteristik mòfolojik oswa tisi li yo, ak virulans li, oswa kapasite li pou siviv kont patojèn yo. Fosfò ka ralanti devlopman an epi diminye gravite pyrosis diri a lè li ogmante sentèz konpoze fenolik yo. Potasyòm jeneralman diminye ensidans anpil maladi diri, tankou pyrosis diri, tach fèy bakteri, tach djenn fèy, pouriti tij, ak tach fèy. Yon etid Perrenoud te fè te montre ke angrè ki gen anpil potasyòm kapab tou diminye ensidans maladi chanpiyon nan diri epi ogmante sede. Anpil etid montre ke angrè souf ka amelyore rezistans rekòt yo kont patojèn chanpiyon yo.27Twòp mayezyòm (yon eleman nan klowofil) ka lakòz diri gonfle.21Zenk ka touye patojèn dirèkteman, kidonk diminye gravite maladi a.22Esè sou teren yo te montre ke byenke konsantrasyon fosfò, potasyòm, souf, ak zenk nan tè jaden an te pi wo pase nan eksperyans po a, pyas diri a toujou gaye nan fèy diri yo. Eleman nitritif nan tè a ka pa efikas anpil pou kontwole pyas diri a, paske imidite relatif ak tanperati a pa favorab pou yon gwo enfestasyon patojèn.
Nan esè sou teren yo, yo te detekte Stenotrophomonas maltophilia, P. dispersa, Xanthomonas sacchari, Burkholderia multivorans, Burkholderia diffusa, Burkholderia vietnamiensis ak C. gleum nan tout tretman yo. Yo te izole Stenotrophomonas maltophilia nan rizosfè ble, avwan, konkonm, mayi ak pòmdetè epi li te montre biokontwòl.aktivitekont Colletotrichum nymphaeae.28 Anplis, yo rapòte ke P. dispersa efikas kont nwapouriti nanpatat dous.29 Anplis de sa, souch R1 Xanthomonas sacchari a te montre aktivite antagonis kont blast diri ak pouriti panikil ki te koze pa Burkholderiaglumae.30Burkholderia oryzae NP19 ka etabli yon relasyon senbyotik ak tisi diri pandan jèminasyon epi vin tounen yon chanpiyon senbyotik andemik pou kèk varyete diri. Pandan ke lòt bakteri nan tè a ka kolonize diri apre transplantasyon, chanpiyon eksplozif NP19 la, yon fwa kolonize, enfliyanse plizyè faktè nan mekanis defans diri kont maladi sa a. NP19 pa sèlman siprime kwasans P. oryzae a plis pase 50% (gade Tablo Siplemantè S1 nan apendis sou entènèt la), men tou li diminye kantite lezyon eksplozif sou fèy yo epi li ogmante sede diri ki inokile oswa kolonize ak NP19 (RBf, RFf-B, ak RBFf-B) nan esè jaden (Figi S3).
Chanpiyon Pyricularia oryzae a, ki lakòz plant ki fèk pran dife, se yon chanpiyon emittwofik ki bezwen eleman nitritif nan men plant lame a pandan enfeksyon an. Plant yo pwodui espès oksijèn reyaktif (ROS) pou siprime enfeksyon chanpiyon an; sepandan, Pyricularia oryzae itilize plizyè estrateji pou konbat ROS ki pwodui pa plant lame a.31Li sanble peroksidaz yo jwe yon wòl nan rezistans patojèn, tankou lyezon kwaze pwoteyin miray selilè, epesman miray ksilèm, pwodiksyon ROS, ak netralizasyon oksijene idwojèn.32Anzim antioksidan yo ka sèvi kòm yon sistèm espesifik pou elimine ROS. Atravè pwopriyete antioksidan yo, siperoksid dismitaz (SOD) ak peroksidaz (POD) ede inisye repons defans, ak SOD k ap sèvi kòm premye liy defans lan.33Nan diri, aktivite peroksidaz plant lan pwovoke apre enfeksyon ak patojèn plant tankou *Pyricularia oryzae* ak *Xanthomonas oryzae pv. Oryzae*.32Nan etid sa a, aktivite peroksidaz la ogmante nan diri ki te kolonize ak/oswa inokile ak *Magnaporthe oryzae* NP19; sepandan, *Magnaporthe oryzae* pa t afekte aktivite peroksidaz la. Superoksid dismitaz (SOD), kòm H₂O₂ sentaz, katalize rediksyon O₂⁻ an H₂O₂. SOD jwe yon wòl enpòtan nan rezistans plant yo a divès estrès lè li balanse konsantrasyon H₂O₂ andedan plant lan, kidonk li amelyore tolerans plant yo a divès estrès³⁴. Nan etid sa a, nan eksperyans nan po a, 30 jou apre inokilasyon *Magnaporthe oryzae* (30 DAT), aktivite SOD yo nan gwoup RF ak RBF yo te 121.9% ak 104.5% pi wo pase sa yo ki nan gwoup R a, respektivman, sa ki endike yon repons SOD a enfeksyon *Magnaporthe oryzae*. Nan eksperyans yo te fè nan po a ak nan jaden an, aktivite SOD yo nan diri ki te inokile ak *Magnaporthe oryzae* NP19 la te 67.7% ak 28.8% pi wo pase sa yo ki nan diri ki pa t inokile a 30 jou apre inokilasyon an, respektivman. Repons byochimik plant yo afekte pa anviwònman an, sous estrès la, ak kalite plant lan³⁵. Aktivite anzim antioksidan plant yo afekte dirèkteman pa faktè anviwònman yo, ki an vire afekte aktivite anzim antioksidan plant yo lè yo modifye kominote mikwòb plant lan.
Chanpiyon maladi diri a (Kosakonia oryziphila NP19, nimewo aksè NCBI PP861312) ki te itilize nan etid sa a se te souch13izole nan rasin kiltivatè diri RD6 nan pwovens Nakhon Phanom, Thailand (16° 59′ 42.9″ N 104° 22′ 17.9″ E). Souch sa a te kiltive nan bouyon eleman nitritif (NB) a 30°C ak 150 rpm pandan 18 èdtan. Pou kalkile konsantrasyon bakteri a, yo te mezire absòbans sispansyon bakteri a a 600 nm. Yo te ajiste konsantrasyon sispansyon bakteri a a10⁶CFU/mL ak dlo deyonize esteril (dH₂OYo te inokile chanpiyon Pyricularia oryzae a sou agar dekstròz pòmdetè (PDA) epi yo te enkube l a 25°C pandan 7 jou. Yo te transfere miselyòm chanpiyon an nan yon medyòm agar son diri (2% (w/v) son diri, 0.5% (w/v) sikwoz, ak 2% (w/v) agar ki fonn nan dlo deyonize, pH 7) epi yo te enkube l a 25°C pandan 7 jou. Yo te mete yon fèy yon kiltivatè diri sansib (KDML105) ki te esterilize sou miselyòm nan pou pwovoke konidi epi yo te enkube l a 25°C pandan 5 jou anba limyè UV ak limyè blan konbine. Yo te kolekte konidi yo lè yo te siye miselyòm nan ak sifas fèy enfekte a dousman ak 10 ml solisyon Tween 20 esterilize 0.025% (v/v). Yo te filtre solisyon chanpiyon an nan uit kouch twal fwomaj pou retire miselyòm nan, agar la, ak fèy diri yo. Yo te ajiste konsantrasyon konidi nan sispansyon an a 5 × 10⁵ konidi/ml pou plis analiz.
Yo te prepare kilti fre selil Kosakonia oryziphila NP19 yo lè yo te kiltive yo nan yon mwayen NB a 37 °C pandan 24 èdtan. Apre santrifijasyon (3047 × g, 10 min), yo te kolekte grenn selilè a, yo te lave l de fwa avèk 10 mM solisyon saline tamponé ak fosfat (PBS, pH 7.2), epi yo te resispann li nan menm tampon an. Yo te mezire dansite optik sispansyon selilè a nan 600 nm, yo te jwenn yon valè apeprè 1.0 (ekivalan a 1.0 × 10⁷ CFU/μl detèmine pa plak agar nitritif). Yo te jwenn konidi P. oryzae yo lè yo te sispann yo nan yon solisyon PBS epi yo te konte yo lè l sèvi avèk yon emositomèt. Sispansyon *K. oryziphila* NP19 ak *P. Pou eksperyans froti fèy yo, yo te prepare konidi K. oryziphila* sou fèy diri fre nan konsantrasyon 1.0 × 10⁷ CFU/μL ak 5.0 × 10² konidi/μL, respektivman. Metòd preparasyon echantiyon diri a te jan sa a: yo te koupe fèy 5 cm longè nan plant diri yo epi yo te mete yo nan bwat Petri ki te kouvri ak papye absòban imid. Yo te etabli senk gwoup tretman: (i) R: fèy diri san inokilasyon bakteri kòm yon kontwòl, complété ak 0.025% (v/v) solisyon Tween 20; (ii) RB + F: diri inokile ak K. oryziphila NP19, complété ak 2 μL sispansyon konidi chanpiyon ki lakòz eksplozyon diri a; (iii) R + BF: Diri nan gwoup R complété ak 4 μl yon melanj sispansyon konidi chanpiyon eksplozyon ak K. oryziphila NP19 (rapò volim 1:1); (iv) R + F: Diri nan gwoup R ki te resevwa sipleman 2 μl sispansyon konidi chanpiyon eksplozif; (v) RF + B: Diri nan gwoup R ki te resevwa sipleman 2 μl sispansyon konidi chanpiyon eksplozif te enkube pandan 30 èdtan, epi answit 2 μl K. oryziphila NP19 te ajoute nan menm plas la. Tout bwat Petri yo te enkube a 25°C nan fènwa pandan 30 èdtan epi answit yo te mete yo anba limyè kontinyèl. Chak gwoup te fòme an triplika. Apre 72 èdtan kilti, tisi plant yo te obsève epi analize pa mikwoskòp elektwonik optik (SEM). An brèf, tisi plant yo te fiks nan yon tanpon fosfat ki gen 2.5% (v/v) glutaraldeyid epi dezidrate atravè yon seri solisyon etanòl. Apre siye nan pwen kritik ak diyoksid kabòn, echantiyon yo te kouvri ak lò epi finalman egzamine lè l sèvi avèk yon mikwoskòp elektwonik optik.15

 


Dat piblikasyon: 15 Desanm 2025