Pwoteyin DELLA yo se mèt konsèveregilatè kwasanski jwe yon wòl santral nan kontwole devlopman plant an repons a siyal entèn ak anviwònman yo. DELLA aji kòm yon regilatè transkripsyon epi li rekrite pou vize pwomotè yo lè li mare ak faktè transkripsyon (TF) ak iston H2A atravè domèn GRAS li a. Etid resan yo montre ke estabilite DELLA a reglemante apre tradiksyon atravè de mekanis: poliubikitinasyon pwovoke pa fitoòmòn giberelin nan, ki mennen nan degradasyon rapid li, ak konjigezon ti modifikatè ki sanble ak ubikitin (SUMO) pou ogmante akimilasyon li. Anplis de sa, aktivite DELLA a reglemante dinamikman pa de glikozilasyon diferan: entèraksyon DELLA-TF a amelyore pa O-fukozilasyon men li inibi pa modifikasyon N-asetilglukozamin (O-GlcNAc) ki lye ak O. Sepandan, wòl fosforilasyon DELLA a rete enkoni, paske etid anvan yo te montre rezilta kontradiktwa, sòti nan sa yo ki montre ke fosforilasyon ankouraje oswa diminye degradasyon DELLA rive nan lòt ki montre ke fosforilasyon pa afekte estabilite li. La a, nou idantifye sit fosforilasyon nan REPRESSOR.ga1-3(RGA, AtDELLA) pirifye soti nan Arabidopsis thaliana pa analiz espektwometri mas epi yo montre ke fosforilasyon de peptid RGA nan rejyon PolyS ak PolyS/T yo pwomote lyezon H2A ak amelyore aktivite RGA. Asosyasyon RGA ak pwomotè sib yo. Notalman, fosforilasyon pa afekte entèraksyon RGA-TF oswa estabilite RGA. Etid nou an revele mekanis molekilè ke fosforilasyon an itilize pou pwovoke aktivite DELLA.
Pou klarifye wòl fosforilasyon nan reglemante fonksyon DELLA a, li enpòtan pou idantifye sit fosforilasyon DELLA yo in vivo epi fè analiz fonksyonèl nan plant yo. Pa pirifikasyon afinite ekstrè plant yo ki te swiv pa analiz MS/MS, nou te idantifye plizyè fosfosit nan RGA. Anba kondisyon defisyans GA, fosforilasyon RHA ogmante, men fosforilasyon an pa afekte estabilite li. Sa ki enpòtan, tès ko-IP ak ChIP-qPCR yo te revele ke fosforilasyon nan rejyon PolyS/T RGA a pwomote entèraksyon li ak H2A ak asosyasyon li ak pwomotè sib yo, sa ki revele mekanis ke fosforilasyon an pwovoke fonksyon RGA.
Yo rekrite RGA pou vize kromatin nan entèraksyon soudomèn LHR1 la ak TF epi answit li mare ak H2A atravè rejyon PolyS/T li a ak soudomèn PFYRE li a, pou fòme konplèks H2A-RGA-TF pou estabilize RGA. Fosforilasyon Pep 2 nan rejyon PolyS/T ant domèn DELLA a ak domèn GRAS la pa yon kinaz enkoni amelyore lyezon RGA-H2A. Pwoteyin mutan rgam2A a aboli fosforilasyon RGA epi adopte yon konformasyon pwoteyin diferan pou entèfere ak lyezon H2A. Sa lakòz destabilizasyon entèraksyon TF-rgam2A tanporè yo ak disosyasyon rgam2A ak kromatin sib la. Figi sa a montre sèlman represyon transkripsyonèl medyatè pa RGA. Yo ka dekri yon modèl menm jan an pou aktivasyon transkripsyonèl medyatè pa RGA, eksepte ke konplèks H2A-RGA-TF la ta pwomouvwa transkripsyon jèn sib la epi defosforilasyon rgam2A ta diminye transkripsyon an. Figi modifye soti nan Huang et al.21.
Tout done kantitatif yo te analize estatistikman lè l sèvi avèk Excel, epi diferans enpòtan yo te detèmine lè l sèvi avèk tès t Student la. Pa gen okenn metòd estatistik ki te itilize pou detèmine gwosè echantiyon an davans. Pa gen okenn done ki te eskli nan analiz la; eksperyans lan pa te randomize; chèchè yo pa t avèg sou distribisyon done yo pandan eksperyans lan ak evalyasyon rezilta yo. Gwosè echantiyon an endike nan lejann figi a ak nan fichye done sous la.
Pou plis enfòmasyon sou konsepsyon etid la, gade Rezime Rapò Pòtfolyo Natirèl ki asosye ak atik sa a.
Yo te kontribye done pwoteyomik sou espektwometri mas bay konsòsyòm ProteomeXchange la atravè depo patnè PRIDE66 la avèk idantifikatè seri done PXD046004. Tout lòt done yo jwenn pandan etid sa a prezante nan Enfòmasyon Siplemantè, Fichye Done Siplemantè, ak Fichye Done Raw yo. Yo bay done sous pou atik sa a.
Dat piblikasyon: 8 novanm 2024