Fosforilasyon aktive mèt kwasans regilatè DELLA nan Arabidopsis pa fè pwomosyon asosyasyon an nan histon H2A ak chromatin.

Pwoteyin DELLA yo konsève mètregilatè kwasans yoki jwe yon wòl santral nan kontwole devlopman plant an repons a siyal entèn ak anviwònman an. DELLA aji kòm yon regilatè transkripsyon epi yo rekrite pou sib pwomotè pa lye ak faktè transcription (TF) ak histon H2A atravè domèn GRAS li. Etid resan yo te montre ke estabilite DELLA se post-tradiksyon reglemante atravè de mekanis: poliubiquitination pwovoke pa giberellin nan fitoormon, ki mennen nan degradasyon rapid li yo, ak konjigezon nan ti ubiquitin-like modifye (SUMO) ogmante akimilasyon li yo. Anplis de sa, aktivite DELLA se dinamik reglemante pa de glycosylations diferan: entèraksyon DELLA-TF amelyore pa O-fucosylation men inibit pa modifikasyon N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) ki lye. Sepandan, wòl fosforilasyon DELLA a rete klè, paske etid anvan yo te montre rezilta konfli, soti nan sa yo ki montre ke fosforilasyon ankouraje oswa diminye degradasyon DELLA a lòt moun ki montre ke fosforilasyon pa afekte estabilite li. Isit la, nou idantifye sit fosforilasyon nan REPRESSORga1-3(RGA, AtDELLA) pirifye soti nan Arabidopsis thaliana pa analiz espektrometri mas epi montre ke fosforilasyon de peptides RGA nan rejyon PolyS ak PolyS/T ankouraje aktivite H2A obligatwa ak amelyore RGA. Asosyasyon RGA ak pwomotè sib yo. Miyò, fosforilasyon pa afekte entèraksyon RGA-TF oswa estabilite RGA. Etid nou an revele mekanis molekilè ki fosforilasyon pwovoke aktivite DELLA.
Pou elicide wòl fosforilasyon nan reglemante fonksyon DELLA, li enpòtan pou idantifye sit fosforilasyon DELLA an vivo epi fè analiz fonksyonèl nan plant yo. Pa pirifikasyon afinite nan ekstrè plant ki te swiv pa MS / MS analiz, nou idantifye plizyè fosfosit nan RGA. Anba kondisyon deficiency GA, fosforilasyon RHA ogmante, men fosforilasyon pa afekte estabilite li yo. Sa ki enpòtan, tès ko-IP ak ChIP-qPCR revele ke fosforilasyon nan rejyon PolyS / T nan RGA ankouraje entèraksyon li yo ak H2A ak asosyasyon li yo ak pwomotè sib, revele mekanis nan ki fosforilasyon pwovoke fonksyon RGA.
Yo rekrite RGA pou vize chromatin atravè entèraksyon sou-domèn LHR1 ak TF epi answit mare ak H2A atravè rejyon PolyS/T li yo ak subdomain PFYRE, ki fòme konplèks H2A-RGA-TF pou estabilize RGA. Fosforilasyon Pep 2 nan rejyon PolyS/T ant domèn DELLA ak domèn GRAS pa yon kinaz ki pa idantifye amelyore koneksyon RGA-H2A. Pwoteyin mutan rgam2A a aboli fosforilasyon RGA epi li adopte yon konfòmasyon pwoteyin diferan pou entèfere ak H2A obligatwa. Sa a rezilta nan destabilizasyon nan entèraksyon pasajè TF-rgam2A ak disosyasyon nan rgam2A soti nan kwomatin sib. Figi sa a dekri sèlman represyon transkripsyon RGA-medyatè. Yo ta ka dekri yon modèl menm jan an pou aktivasyon transkripsyon RGA-medyatè, eksepte ke konplèks H2A-RGA-TF ta ankouraje transkripsyon jèn sib ak defosforilasyon rgam2A ta diminye transkripsyon. Figi modifye nan Huang et al.21.
Tout done quantitative yo te analize estatistik ak Excel, epi yo te detèmine diferans enpòtan yo lè l sèvi avèk tès t Student la. Pa gen okenn metòd estatistik yo te itilize pou preliminèman detèmine gwosè echantiyon an. Pa gen okenn done yo te eskli nan analiz la; eksperyans la pa te randomized; chèchè yo pa t avèg nan distribisyon done pandan eksperyans la ak evalyasyon rezilta yo. Gwosè echantiyon an endike nan lejand figi a ak dosye done sous.
Pou plis enfòmasyon sou konsepsyon etid la, gade Rezime Rapò Portfolio Natirèl ki asosye ak atik sa a.
Done pwoteomik espektometri mas yo te kontribye nan consortium ProteomeXchange atravè depo patnè PRIDE66 ak idantifyan ansèy done PXD046004. Tout lòt done yo jwenn pandan etid sa a yo prezante nan Enfòmasyon Siplemantè, Fichye Done Siplemantè, ak Fichye Done kri. Done sous yo bay pou atik sa a.