Itilizasyon pestisid sentetik toupatou lakòz anpil pwoblèm, tankou aparisyon òganis rezistan, degradasyon anviwònman an ak domaj pou sante moun. Se poutèt sa, nouvo mikwòb...pestisidYo bezwen ijan biosurfaktan rhamnolipid ki pwodui pa Enterobacter cloacae SJ2 pou evalye toksisite pou lav moustik (Culex quinquefasciatus) ak tèmit (Odontotermes obesus). Rezilta yo te montre ke te gen yon to mòtalite ki depann de dòz ant tretman yo. Yo te detèmine valè LC50 (50% konsantrasyon letal) nan 48 èdtan pou biosurfaktan lav tèmit ak moustik lè l sèvi avèk yon metòd ajisteman koub regresyon non lineyè. Rezilta yo te montre ke valè LC50 48 èdtan (95% entèval konfyans) pou aktivite larvisid ak antitèmit biosurfaktan an te 26.49 mg/L (ranje 25.40 a 27.57) ak 33.43 mg/L (ranje 31.09 a 35.68) respektivman. Dapre egzamen istopatolojik la, tretman ak biosurfaktan yo te lakòz domaj grav nan tisi òganèl lav ak tèmit yo. Rezilta etid sa a endike ke biotensioaktif mikwòb ki pwodui pa Enterobacter cloacae SJ2 a se yon zouti ekselan e potansyèlman efikas pou kontwòl Cx. quinquefasciatus ak O. obesus.
Peyi twopikal yo fè eksperyans yon gwo kantite maladi moustik transmèt1. Enpòtans maladi moustik transmèt yo gaye toupatou. Plis pase 400,000 moun mouri ak malarya chak ane, epi kèk gwo vil ap fè eksperyans epidemi maladi grav tankou deng, lafyèv jòn, chikungunya ak Zika.2 Maladi vektè yo asosye avèk youn sou sis enfeksyon atravè lemond, moustik yo lakòz ka ki pi enpòtan yo3,4. Culex, Anopheles ak Aedes se twa fanmi moustik ki pi souvan asosye avèk transmisyon maladi5. Prevalans lafyèv deng, yon enfeksyon moustik Aedes aegypti a transmèt, ogmante pandan deseni ki sot pase a epi li poze yon menas enpòtan pou sante piblik4,7,8. Dapre Òganizasyon Mondyal Lasante (OMS), plis pase 40% nan popilasyon mondyal la an danje pou lafyèv deng, ak 50-100 milyon nouvo ka ki rive chak ane nan plis pase 100 peyi9,10,11. Lafyèv deng vin tounen yon gwo pwoblèm sante piblik pandan ensidans li ogmante atravè lemond12,13,14. Anopheles gambiae, ke yo konnen sou non moustik Anopheles afriken an, se vektè ki pi enpòtan nan malarya imen nan rejyon twopikal ak subtropikal yo15. Viris Nil Lwès la, ansefalit Saint-Louis la, ansefalit japonè a, ak enfeksyon viral chwal ak zwazo yo transmèt pa moustik Culex, ke yo souvan rele moustik kay komen. Anplis de sa, yo se transpòtè maladi bakteri ak parazit tou16. Gen plis pase 3,000 espès tèmit nan mond lan, epi yo egziste depi plis pase 150 milyon ane17. Pifò ensèk nuizib yo ap viv nan tè a epi yo manje bwa ak pwodui bwa ki gen seluloz. Tèmit Endyen Odontotermes obesus la se yon ensèk nuizib enpòtan ki lakòz gwo domaj nan rekòt enpòtan ak pyebwa plantasyon18. Nan zòn agrikòl yo, enfestasyon tèmit nan divès etap ka lakòz gwo domaj ekonomik nan divès rekòt, espès pyebwa ak materyèl konstriksyon. Tèmit yo kapab lakòz pwoblèm sante moun tou19.
Pwoblèm rezistans kont mikwo-òganis ak ensèk nuizib nan domèn famasetik ak agrikòl jodi a konplèks20,21. Se poutèt sa, tou de konpayi yo ta dwe chèche nouvo antimikwòb ki pa koute chè ak biopestisid ki an sekirite. Pestisid sentetik yo disponib kounye a epi yo montre yo enfektye epi repouse ensèk benefik ki pa sib22. Nan dènye ane yo, rechèch sou biosurfaktan yo te elaji akòz aplikasyon yo nan divès endistri yo. Biosurfaktan yo trè itil epi vital nan agrikilti, remèd tè, ekstraksyon petwòl, retire bakteri ak ensèk, ak pwosesis manje23,24. Biosurfaktan oswa surfaktan mikwòb yo se pwodui chimik biosurfaktan ki pwodui pa mikwo-òganis tankou bakteri, ledven ak fongis nan abita kotyè ak zòn ki kontamine ak lwil25,26. Surfaktan ak biosurfaktan ki sòti chimikman se de kalite ki jwenn dirèkteman nan anviwònman natirèl la27. Divès biosurfaktan yo jwenn nan abita maren28,29. Se poutèt sa, syantis yo ap chèche nouvo teknoloji pou pwodiksyon biosurfaktan ki baze sou bakteri natirèl30,31. Pwogrè nan rechèch sa yo demontre enpòtans konpoze byolojik sa yo pou pwoteksyon anviwònman an32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium ak fanmi bakteri sa yo se reprezantan byen etidye23,33.
Gen anpil kalite byosiraktif ki gen yon pakèt aplikasyon34. Yon avantaj enpòtan nan konpoze sa yo se ke kèk nan yo gen aktivite anti-bakteri, larvisid ak ensektisid. Sa vle di ke yo ka itilize nan endistri agrikòl, chimik, famasetik ak kosmetik35,36,37,38. Paske byosiraktif yo jeneralman biodégradab epi benefik pou anviwònman an, yo itilize yo nan pwogram jesyon entegre ensèk nuizib pou pwoteje rekòt39. Kidonk, yo te jwenn konesans debaz sou aktivite larvisid ak antitèmit byosiraktif mikwòb ki pwodui pa Enterobacter cloacae SJ2. Nou te egzamine mòtalite ak chanjman istolojik lè yo ekspoze a diferan konsantrasyon byosiraktif rhamnolipid. Anplis de sa, nou te evalye pwogram òdinatè Quantitative Structure-Activity (QSAR) ki lajman itilize a, Ecological Structure-Activity (ECOSAR) pou detèmine toksisite egi pou mikwoalg, dafni ak pwason.
Nan etid sa a, yo te teste aktivite antitèmit (toksisite) biosurfaktan pirifye yo nan divès konsantrasyon sòti nan 30 a 50 mg/ml (nan entèval 5 mg/ml) kont tèmit Endyen, O. obesus ak katriyèm espès la) Evalye. Lav nan estad Cx. Lav moustik quinquefasciatus. Konsantrasyon LC50 biosurfaktan sou 48 èdtan kont O. obesus ak Cx. C. solanacearum. Yo te idantifye lav moustik yo lè l sèvi avèk yon metòd ajisteman koub regresyon non lineyè. Rezilta yo te montre ke mòtalite tèmit yo ogmante ak ogmantasyon konsantrasyon biosurfaktan an. Rezilta yo te montre ke biosurfaktan an te gen aktivite larvisid (Figi 1) ak aktivite anti-tèmit (Figi 2), ak valè LC50 48 èdtan (95% CI) de 26.49 mg/L (25.40 a 27.57) ak 33.43 mg/l (Fig. 31.09 a 35.68), respektivman (Tablo 1). An tèm de toksisite egi (48 èdtan), biosurfaktan an klase kòm "danjere" pou òganis yo teste yo. Biosurfaktan ki te pwodui nan etid sa a te montre yon ekselan aktivite larvisid ak 100% mòtalite nan lespas 24-48 èdtan apre ekspozisyon.
Kalkile valè LC50 pou aktivite larvisid la. Ajisteman koub regresyon non lineyè (liy solid) ak entèval konfyans 95% (zòn fonse) pou mòtalite relatif (%).
Kalkile valè LC50 pou aktivite anti-tèmit. Ajisteman koub regresyon non lineyè (liy solid) ak entèval konfyans 95% (zòn fonse) pou mòtalite relatif (%).
Nan fen eksperyans lan, yo te obsève chanjman mòfolojik ak anomali anba mikwoskòp la. Yo te obsève chanjman mòfolojik nan gwoup kontwòl la ak gwoup trete yo nan yon agrandisman 40x. Jan yo montre nan Figi 3, te gen pwoblèm kwasans nan majorite lav ki te trete ak biotensioaktif yo. Figi 3a montre yon Cx. quinquefasciatus nòmal, Figi 3b montre yon Cx. anomal. Li lakòz senk lav nematod.
Efè dòz subletal (LC50) biotensioaktif yo sou devlopman lav Culex quinquefasciatus yo. Imaj mikwoskopi optik (a) yon Cx nòmal nan yon agrandisman 40×. quinquefasciatus (b) Cx anòmal. Lakòz senk lav nematod.
Nan etid sa a, egzamen istolojik lav trete yo (Fig. 4) ak tèmit yo (Fig. 5) te revele plizyè anomali, tankou rediksyon nan zòn nan vant ak domaj nan misk, kouch epitelyal ak po nan mitan trip la. Istoloji a te revele mekanis aktivite inibitwa biosurfaktan ki te itilize nan etid sa a.
Istopatoloji lav Cx 4yèm etap nòmal san tretman. Lav quinquefasciatus (kontwòl: (a,b)) epi trete ak byosiraktif (tretman: (c,d)). Flèch yo endike epitelyòm entesten trete (epi), nwayo (n), ak misk (mu). Ba = 50 µm.
Istopatoloji O. obesus nòmal san tretman (kontwòl: (a,b)) ak trete ak byosiraktif (tretman: (c,d)). Flèch yo endike epitelyòm entesten an (epi) ak misk (mu), respektivman. Ba = 50 µm.
Nan etid sa a, yo te itilize ECOSAR pou predi toksisite egi pwodui biotensioaktif rhamnolipid yo pou pwodiktè prensipal yo (alg vèt), konsomatè prensipal yo (pis dlo) ak konsomatè segondè yo (pwason). Pwogram sa a itilize modèl konpoze estrikti-aktivite kantitatif sofistike pou evalye toksisite ki baze sou estrikti molekilè. Modèl la itilize lojisyèl estrikti-aktivite (SAR) pou kalkile toksisite egi ak alontèm sibstans yo pou espès akwatik yo. Espesyalman, Tablo 2 rezime konsantrasyon letal mwayèn estime yo (LC50) ak konsantrasyon efektif mwayèn yo (EC50) pou plizyè espès. Yo te klase toksisite sispèk la an kat nivo lè l sèvi avèk Sistèm Klasifikasyon ak Etikèt Pwodui Chimik yo ki Globalman Amonize (Tablo 3).
Kontwòl maladi ki transmèt pa vektè, sitou souch moustik ak moustik Aedes. Moun peyi Lejip yo, kounye a, fè travay difisil 40,41,42,43,44,45,46. Malgre ke kèk pestisid ki disponib chimikman, tankou piretroid ak òganofosfat, gen yon ti benefis, yo poze gwo risk pou sante moun, tankou dyabèt, pwoblèm repwodiktif, pwoblèm newolojik, kansè ak maladi respiratwa. Anplis, avèk letan, ensèk sa yo ka vin rezistan a yo13,43,48. Kidonk, mezi kontwòl byolojik efikas e ki respekte anviwònman an ap vin yon metòd kontwòl moustik ki pi popilè49,50. Benelli51 te sigjere ke kontwòl bonè vektè moustik yo ta pi efikas nan zòn iben yo, men yo pa t rekòmande itilizasyon larvisid nan zòn riral yo52. Tom et al 53 te sigjere tou ke kontwole moustik nan etap ki pa devlope yo ta yon estrateji ki an sekirite e senp paske yo pi sansib a ajan kontwòl yo 54.
Pwodiksyon byosiraktif pa yon souch pisan (Enterobacter cloacae SJ2) te montre yon efikasite konsistan e pwomèt. Etid anvan nou an te rapòte ke Enterobacter cloacae SJ2 optimize pwodiksyon byosiraktif lè l sèvi avèk paramèt fizikochimik26. Dapre etid yo a, kondisyon optimal pou pwodiksyon byosiraktif pa yon potansyèl izolat E. cloacae se te enkubasyon pandan 36 èdtan, ajitasyon a 150 rpm, pH 7.5, 37 °C, salinite 1 ppt, 2% glikoz kòm sous kabòn, 1% ledven. Ekstrè a te itilize kòm yon sous nitwojèn pou jwenn 2.61 g/L byosiraktif. Anplis de sa, byosiraktif yo te karakterize lè l sèvi avèk TLC, FTIR ak MALDI-TOF-MS. Sa a te konfime ke rhamnolipid se yon byosiraktif. Byosiraktif glikolipid yo se klas ki pi etidye nan lòt kalite byosiraktif55. Yo konsiste de pati idrat kabòn ak lipid, sitou chenn asid gra. Pami glikolipid yo, prensipal reprezantan yo se rhamnolipid ak soforolipid56. Rhamnolipid yo genyen de pati ramnoz ki lye ak asid mono- oswa di-β-idwoksidekanoik 57. Itilizasyon rhamnolipid nan endistri medikal ak famasetik yo byen etabli 58, anplis itilizasyon resan yo kòm pestisid 59.
Entèraksyon biotensioaktif la ak rejyon idrofob sifon respiratwa a pèmèt dlo pase nan kavite stomatal li a, kidonk ogmante kontak lav yo ak anviwònman akwatik la. Prezans biotensioaktif yo afekte trache a tou, ki gen longè toupre sifas la, sa ki fè li pi fasil pou lav yo monte sou sifas la epi respire. Kòm rezilta, tansyon sifas dlo a diminye. Piske lav yo pa ka tache ak sifas dlo a, yo tonbe nan fon tank la, sa ki deranje presyon idrostatik la, sa ki lakòz yon depans enèji twòp ak lanmò pa nwaye38,60. Ghribi61 te jwenn rezilta menm jan an, kote yon biotensioaktif ki pwodui pa Bacillus subtilis te montre aktivite larvisid kont Ephestia kuehniella. Menm jan an tou, aktivite larvisid Cx. Das ak Mukherjee23 te evalye tou efè lipopeptid siklik yo sou lav quinquefasciatus.
Rezilta etid sa a konsène aktivite larvisid biosifaktan ramnolipid kont Cx. Touye moustik quinquefasciatus yo konsistan avèk rezilta ki te pibliye deja. Pa egzanp, yo itilize biosifaktan ki baze sou surfaktin ki pwodui pa divès bakteri nan genus Bacillus. ak Pseudomonas spp. Kèk rapò bonè64,65,66 te rapòte aktivite touye lav nan biosifaktan lipopeptid ki soti nan Bacillus subtilis23. Deepali et al.63 te jwenn ke biosifaktan ramnolipid izole nan Stenotropomonas maltophilia te gen yon aktivite larvisid pwisan nan yon konsantrasyon 10 mg/L. Silva et al.67 te rapòte aktivite larvisid biosifaktan ramnolipid kont Ae nan yon konsantrasyon 1 g/L. Aedes aegypti. Kanakdande et al. 68 rapòte ke biotensioaktif lipopeptid ki pwodui pa Bacillus subtilis te lakòz mòtalite jeneral nan lav Culex ak tèmit ak fraksyon lipofilik Eucalyptus la. Menm jan an tou, Masendra et al. 69 rapòte yon mòtalite foumi ouvriyè (Cryptotermes cynocephalus Light.) ki te 61.7% nan fraksyon lipofilik n-hexane ak EtOAc nan ekstrè brit E.
Parthipan et al 70 te rapòte itilizasyon ensektisid biosurfaktan lipopeptid ki pwodui pa Bacillus subtilis A1 ak Pseudomonas stutzeri NA3 kont Anopheles Stephensi, yon vektè parazit malarya Plasmodium lan. Yo te obsève ke lav ak krizalid te siviv pi lontan, te gen peryòd ovipozisyon pi kout, yo te esteril, epi yo te gen dire lavi pi kout lè yo te trete yo ak diferan konsantrasyon biosurfaktan. Valè LC50 yo te obsève pou biosurfaktan A1 B. subtilis la te 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 ak 7.99 mg/L pou diferan eta lav (sa vle di lav I, II, III, IV ak etap krizalid) respektivman. An konparezon, biosurfaktan pou etap lav I-IV ak etap krizalid Pseudomonas stutzeri NA3 yo te 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 ak 6.99 mg/L, respektivman. Yo panse fenoloji reta lav ak krizal siviv yo se rezilta gwo twoub fizyolojik ak metabolik ki koze pa tretman ensektisid71.
Souch Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 la pwodui yon biotensioaktif ki gen 100% aktivite larvisid kont moustik Aedes. Entèval 24 èdtan aegypti a 38 te pi wo pase sa Silva et al. te rapòte. Yon biotensioaktif ki pwodui apati Pseudomonas aeruginosa lè l sèvi avèk lwil tounsòl kòm sous kabòn te montre li touye 100% lav nan 48 èdtan 67. Abinaya et al.72 ak Pradhan et al.73 te demontre tou efè larvisid oswa ensektisid tensioaktif ki pwodui pa plizyè izolat nan genus Bacillus la. Yon etid ki te pibliye deja pa Senthil-Nathan et al. te jwenn ke 100% lav moustik ki ekspoze nan lagon plant yo te gen chans pou yo mouri. 74.
Evalye efè subletal ensektisid yo sou byoloji ensèk enpòtan anpil pou pwogram jesyon entegre ensèk nuizib paske dòz/konsantrasyon subletal yo pa touye ensèk men yo ka diminye popilasyon ensèk nan jenerasyon kap vini yo lè yo deranje karakteristik byolojik yo10. Siqueira et al 75 te obsève aktivite larvisid konplè (100% mòtalite) nan biosurfaktan rhamnolipid (300 mg/ml) lè yo teste l nan divès konsantrasyon ki sòti nan 50 a 300 mg/ml. Etap lav souch Aedes aegypti yo. Yo te analize efè tan pou lanmò ak konsantrasyon subletal sou siviv lav yo ak aktivite naje. Anplis de sa, yo te obsève yon diminisyon nan vitès naje apre 24-48 èdtan ekspozisyon a konsantrasyon subletal biosurfaktan (pa egzanp, 50 mg/mL ak 100 mg/mL). Yo panse pwazon ki gen wòl subletal pwomèt yo pi efikas nan lakòz plizyè domaj sou ensèk nuizib ki ekspoze yo76.
Obsèvasyon istolojik rezilta nou yo endike ke biotensioaktif ki pwodui pa Enterobacter cloacae SJ2 modifye anpil tisi lav moustik (Cx. quinquefasciatus) ak tèmit (O. obesus). Anomali menm jan an te koze pa preparasyon lwil bazilik nan An. gambiaes.s epi Ochola77 te dekri An. arabica. Kamaraj et al.78 te dekri tou menm anomali mòfolojik yo nan An. Lav Stephanie yo te ekspoze a nanopartikil lò. Vasantha-Srinivasan et al.79 te rapòte tou ke lwil esansyèl bous bèje a te domaje anpil chanm lan ak kouch epitelyal Aedes albopictus yo. Aedes aegypti. Raghavendran et al. te rapòte ke lav moustik yo te trete ak 500 mg/ml ekstrè miselyèl yon chanpiyon Penicillium lokal. Ae montre domaj istolojik grav. aegypti ak Cx. To mòtalite 80. Anvan sa, Abinaya et al. Yo te etidye lav katriyèm etap An. Stephensi ak Ae. aegypti te jwenn anpil chanjman istolojik nan Aedes aegypti trete ak ègzopolisakarid B. licheniformis, tankou sekòm gastrik, atrofi miskilè, domaj ak dezòganizasyon gangliyon kòd nè yo72. Dapre Raghavendran et al., apre tretman ak ekstrè miselyèl P. daleae, selil mitan trip moustik teste yo (lav 4yèm etap) te montre anfle nan limen entesten an, yon diminisyon nan kontni entèselilè, ak dejenerasyon nikleyè81. Menm chanjman istolojik yo te obsève nan lav moustik trete ak ekstrè fèy echinacea, sa ki endike potansyèl ensektisid konpoze trete yo50.
Itilizasyon lojisyèl ECOSAR la te resevwa rekonesans entènasyonal82. Rechèch aktyèl yo sijere ke toksisite egi biotensioaktif ECOSAR yo pou mikwoalg (C. vulgaris), pwason ak pis dlo (D. magna) tonbe anba kategori "toksisite" Nasyonzini defini83. Modèl ekotoksisite ECOSAR la itilize SAR ak QSAR pou predi toksisite egi ak alontèm sibstans yo epi li souvan itilize pou predi toksisite polyan òganik yo82,84.
Paraformaldeyid, tanpon fosfat sodyòm (pH 7.4) ak tout lòt pwodui chimik yo te itilize nan etid sa a te achte nan men HiMedia Laboratories, peyi Zend.
Yo te pwodui byosiraktif la nan flakon Erlenmeyer 500 mL ki gen 200 mL medyòm Bushnell Haas esteril complété ak 1% lwil brit kòm sèl sous kabòn. Yo te inokile yon prekilti Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) epi yo te kiltive l sou yon ajitatè òbital a 37°C, 200 rpm pandan 7 jou. Apre peryòd enkubasyon an, yo te ekstrè byosiraktif la lè yo te santrifije medyòm kilti a a 3400×g pandan 20 min a 4°C epi yo te itilize sipènatant ki te sòti a pou rezon tès depistaj. Yo te adopte pwosedi optimize ak karakterizasyon byosiraktif yo nan etid anvan nou an26.
Yo te jwenn lav Culex quinquefasciatus yo nan Sant pou Etid Avanse nan Biyoloji Marin (CAS), Palanchipetai, Tamil Nadu (India). Yo te elve lav yo nan resipyan plastik ki te ranpli ak dlo deyonize a 27 ± 2°C ak yon fotoperyòd 12:12 (limyè:fènwa). Yo te bay lav moustik yo manje yon solisyon glikoz 10%.
Yo te jwenn lav Culex quinquefasciatus nan fos septik ouvè ak san pwoteksyon. Sèvi ak direktiv klasifikasyon estanda pou idantifye ak kiltive lav nan laboratwa a85. Yo te fè esè larvisid yo dapre rekòmandasyon Òganizasyon Mondyal Lasante 86. SH. Yo te kolekte lav quinquefasciatus nan katriyèm etap la nan tib fèmen an gwoup 25 ml ak 50 ml ak yon espas lè de de tyè nan kapasite yo. Yo te ajoute byosiraktif (0–50 mg/ml) nan chak tib endividyèlman epi yo te estoke l a 25 °C. Tib kontwòl la te itilize sèlman dlo distile (50 ml). Yo te konsidere lav mouri kòm sa yo ki pa t montre okenn siy naje pandan peryòd enkubasyon an (12–48 èdtan) 87. Kalkile pousantaj mòtalite lav la lè l sèvi avèk ekwasyon an. (1)88.
Fanmi Odontotermitidae a gen ladan tèmit Endyen Odontotermes obesus la, yo jwenn li nan bwa pouri nan Kanpis Agrikòl la (Inivèsite Annamalai, peyi Zend). Teste byosiraktif sa a (0–50 mg/ml) lè l sèvi avèk pwosedi nòmal pou detèmine si li danjere. Apre yo fin seche l nan yon koule lè laminè pandan 30 minit, yo te kouvri chak bann papye Whatman ak byosiraktif nan yon konsantrasyon 30, 40, oswa 50 mg/ml. Yo te teste bann papye pre-kouvwi ak san kouch epi yo te konpare yo nan sant yon bwat Petri. Chak bwat Petri gen anviwon trant tèmit aktif O. obesus. Yo te bay tèmit kontwòl ak tèmit tès yo papye mouye kòm sous manje. Yo te kenbe tout plak yo nan tanperati chanm pandan tout peryòd enkubasyon an. Tèmit yo te mouri apre 12, 24, 36 ak 48 èdtan89,90. Apre sa, yo te itilize ekwasyon 1 pou estime pousantaj mòtalite tèmit nan diferan konsantrasyon byosiraktif. (2).
Yo te kenbe echantiyon yo sou glas epi yo te mete yo nan mikwotib ki gen 100 ml 0.1 M tanpon fosfat sodyòm (pH 7.4) epi yo te voye yo nan Laboratwa Santral Patoloji Akwakilti (CAPL) nan Sant Rajiv Gandhi pou Akwakilti (RGCA). Laboratwa Istoloji, Sirkali, Mayiladuthurai. Distri, Tamil Nadu, peyi Zend pou plis analiz. Yo te fikse echantiyon yo imedyatman nan 4% paraformaldeyid a 37°C pandan 48 èdtan.
Apre faz fiksasyon an, yo te lave materyèl la twa fwa avèk 0.1 M solisyon tampon fosfat sodyòm (pH 7.4), yo te dezidrate l piti piti nan etanòl epi yo te tranpe l nan résine LEICA pandan 7 jou. Apre sa, yo te mete sibstans lan nan yon mwazi plastik ki te ranpli avèk résine ak polimerizatè, epi answit yo te mete l nan yon fou ki chofe a 37°C jiskaske blòk ki gen sibstans lan fin polimerize nèt.
Apre polimerizasyon an, blòk yo te koupe avèk yon mikwotòm LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, USA) nan yon epesè 3 mm. Seksyon yo gwoupe sou lam, ak sis seksyon pou chak lam. Lam yo te seche nan tanperati chanm, answit yo te kolore ak ematoksilin pandan 7 minit epi yo te lave yo ak dlo k ap koule pandan 4 minit. Anplis de sa, aplike solisyon eozin lan sou po a pandan 5 minit epi rense l ak dlo k ap koule pandan 5 minit.
Yo te predi toksisite egi a lè yo te itilize òganis akwatik ki soti nan diferan nivo twopikal: LC50 pwason sou 96 èdtan, LC50 D. magna sou 48 èdtan, ak EC50 alg vèt sou 96 èdtan. Yo te evalye toksisite biotensioaktif rhamnolipid yo pou pwason ak alg vèt lè yo te itilize lojisyèl ECOSAR vèsyon 2.2 pou Windows ke Ajans Pwoteksyon Anviwònman Etazini te devlope. (Disponib sou entènèt nan https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Tout tès pou aktivite larvisid ak antitèmit yo te fèt an triplika. Yo te fè regresyon non lineyè (logaritm varyab dòz-repons) done mòtalite lav ak tèmit pou kalkile konsantrasyon letal medyàn (LC50) ak yon entèval konfyans 95%, epi yo te pwodui koub repons konsantrasyon yo lè l sèvi avèk Prism® (vèsyon 8.0, GraphPad Software) Inc., Etazini) 84, 91.
Etid sa a revele potansyèl biosurfaktan mikwòb ki pwodui pa Enterobacter cloacae SJ2 kòm ajan larvisid ak antitèmit kont moustik, e travay sa a pral kontribye nan yon pi bon konpreyansyon sou mekanis aksyon larvisid ak antitèmit yo. Etid istolojik sou lav trete ak biosurfaktan yo te montre domaj nan aparèy dijestif la, nan trip mitan an, nan kòtèks serebral la ak ipèplazi nan selil epitelyal entesten yo. Rezilta yo: Evalyasyon toksikolojik aktivite antitèmit ak larvisid biosurfaktan rhamnolipid ki pwodui pa Enterobacter cloacae SJ2 a te revele ke izolat sa a se yon biopestisid potansyèl pou kontwòl maladi vektè ki koze pa moustik (Cx quinquefasciatus) ak tèmit (O. obesus). Gen yon bezwen pou konprann toksisite anviwònmantal ki kache nan biosurfaktan yo ak enpak anviwònmantal potansyèl yo. Etid sa a bay yon baz syantifik pou evalye risk anviwònmantal biosurfaktan yo.
Lè pòs la: 9 avril 2024